Hallo!
Kann mir einer verraten wo ich im Inet kurz nachlesen kann, wie die Hybridomzellen aus den Myelomzellen und den gewonnen Plasmazellen selektiert werden?
Das hat ja was mit dem Nukleotidstoffwechsel zu tun, aber weil Ryanair so wenig Gepäck erlaubt hab ich hier momentan fast kein Buch mehr ;(
Ach ja. Wieso sagt man da eigentlich Myelomzellen? Es sollten doch eigentlich B-Zelllymphomzellen sein, die man da fusioniert oder? Also warum sagt man nicht Lymphomzellen?
Gruß, Stefan
Hallo Stefan,
Kann mir einer verraten wo ich im Inet kurz nachlesen kann,
wie die Hybridomzellen aus den Myelomzellen und den gewonnen
Plasmazellen selektiert werden?
Die induzierten Milz-B-Zellen sind TK+ und HPGRT+, d.h. sie besitzen die Thymidinkinase und die Hypoxynthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (–> salvage pathway) und können in hypoxanthin- und thymidinhaltigem Medium wachsen, sind aber nicht immortal. Die Myelomzellen können Nukleotide zwar de novo synthetisieren, sind aber TK-, HPGRT- und immortal. Fusioniert man nun beide Zelltypen, dann entstehen die Hybridomzellen, welche TK+ und HPGRT+ sind, De-Novo-Synthese betreiben können und immortal sind. Nebenbei entstehen auch Milz-Milz- und Myelom-Myelom-Fusionszellen.
Selektiert werden die Milz-Myelom-Zellen in HAT-Medium. HAT steht für Hypoxanthin, Aminopterin und Thymidin. Hierbei blockiert Aminopterin die De-Novo-Synthese.
Folge: Die unfusionierten Milz-Zellen sowie die Milz-Milz-Zellen sterben ab, da sie nicht immortal sind. Die unfusionierten Myelomzellen sowie die Myelom-Myelom-Zellen sterben ab, weil die De-Novo-Synthese durch das Aminopterin gehemmt wird und der salvage pathway nicht möglich ist. Nur die Hybridomzellen, welche zugleich immortal sind und den salvage pathway nutzen können, werden in diesem Medium überleben. Dann müssen nur noch Klone vereinzelt werden und man erhält seine gewünschten monoklonalen AK.
Ach ja. Wieso sagt man da eigentlich Myelomzellen? Es sollten
doch eigentlich B-Zelllymphomzellen sein, die man da
fusioniert oder? Also warum sagt man nicht Lymphomzellen?
Schau mal hier (erster Abschnitt):
http://www.krebsgesellschaft.de/plasmozytom,27478.html
Weitere Links:
http://de.wikipedia.org/wiki/Monoklonaler_Antik%C3%B…
http://www.ev-stift-gymn.guetersloh.de/fileadmin/Unt…
http://www.uni-mainz.de/FB/Medizin/immunologie/de/ne…
LG
Huttatta